??(1)胞外聚合物的提取 胞外聚合物（Extracelluler Polymer Substances, EPS）與細(xì)胞結(jié)合緊密，需要特定的方法才能將其從污泥中分離提出。在本實(shí)驗(yàn)中采用Fr?lund等人[ ]的方法來(lái)提取活性污泥表面的胞外聚合物。
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首先，從反應(yīng)器中取50mL活性污泥樣品，在2000g、室溫下離心15min后倒出上清液。離心后再向留在離心管內(nèi)的生物體加入由526mg?L-1 NaCl，74。56mg?L-1KCl，760。2mg?L-1Na3PO4和552mg?L-1NaH2PO4組成的磷酸鹽緩沖溶液，使之再次呈懸浮液態(tài)。
??再將懸浮污泥樣品移入燒杯中，在其中加入90g?gMLVSS-1的離子交換樹脂（732陽(yáng)離子交換樹脂）并以600rpm轉(zhuǎn)速攪拌2h，使之混合。混合后再于4000g離心300min以去除樹脂和生物體，上清液則為EPS提取液[ ]。

(2)胞外聚合物的分析方法 EPS提取物中主要是多糖、蛋白質(zhì)和DNA。
??多糖的測(cè)定采用蒽酮—H2SO4比色法[ ]。即高溫下糖類會(huì)被H2SO4脫水生成糠醛或糠醛衍生物，并與蒽酮（C14H10O）縮合成藍(lán)色化合物，在620nm處測(cè)定吸光度（721型分光光度計(jì)），以葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線可換算出多糖的含量[ , ]。

蛋白質(zhì)采用紫外吸收法測(cè)定，同時(shí)測(cè)定260nm和280nm處的吸光度，利用下式計(jì)算蛋白質(zhì)的濃度(mg?mL-1)：ρ蛋白質(zhì)=1。
??45×A280nm-0。74×A260nm，該方法可消除樣品中和算對(duì)測(cè)定值的干擾。EPS的含量最終以單位質(zhì)量MLVSS中各成分的總量計(jì)。

DNA的測(cè)定采用修正的Brunk方法[ ]，主要試劑為：用100 mM NaCl中配制0。2 ppm DAPI試劑 (4, 6-二咪基-2-苯基吲哚)，10 mM EDTA，10 mM TRIS，pH 7。
??步驟: 將100 μL的 EPS 提取液用吸液管裝入試管中并加入2。5 ml上述試劑。直接測(cè)定樣品（激發(fā)波長(zhǎng)360nm、發(fā)射波長(zhǎng)450 nm），Salmon實(shí)驗(yàn)采用標(biāo)準(zhǔn)方法。

標(biāo)簽：聚合物胞外聚合物